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非洲豬瘟檢測(cè)儀的性能及操作使用

更新時(shí)間:2022-01-20      點(diǎn)擊次數(shù):1243

TH-Q320非洲豬瘟檢測(cè)儀是【天合環(huán)境】根據(jù)市場(chǎng)需求研發(fā)的實(shí)時(shí)檢測(cè)反應(yīng)的儀器,主要由基因擴(kuò)增熱循環(huán)組件、微量熒光檢測(cè)光學(xué)系統(tǒng)、微電路控制系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)及應(yīng)用軟件組成。

FT-PCR-7_看圖王.jpg


產(chǎn)品特點(diǎn):

1.體積小,重量輕

整機(jī)外尺寸:寬*深*高:235×385×175mm,總重量?jī)H5.7kg

2.升降溫速率

采用Marlow公司PCR專用大功率半導(dǎo)體制冷片,在保證100000次循環(huán)的壽命條件下,為模塊提供更高的升降溫速率

3.控溫精度

采用全新的控溫算法為模塊控溫提供更高的控制精度和準(zhǔn)確度

4.溫度均勻性

全新設(shè)計(jì)的加熱體,模擬加熱體結(jié)構(gòu)熱量分布,為模塊提供更好的溫度均勻性

5.高激發(fā)效率

采用CREE公司的高亮度長(zhǎng)壽命LED作為激發(fā)光源,以低損耗玻璃光纖作為傳導(dǎo)介質(zhì),為試劑提供更高的激發(fā)光能量

6.高靈敏度

采用歐司朗高靈敏度,高信噪比光電二極管對(duì)微弱輻射熒光信號(hào)進(jìn)行采集,為熒光檢測(cè)提供更高的靈敏度

7.激發(fā)采集波段靈活可變

標(biāo)配四色熒光,熒光波段可根據(jù)客戶需求進(jìn)行選擇,光譜波段更靈活,更好地匹配各廠家的熒光染料與探針


非洲豬瘟檢測(cè)儀操作步驟:

1、病毒DNA的提?。ㄊ褂肁盒)

(1)待檢樣品、陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照的份數(shù)總和用n表示,取n個(gè)滅菌的1.5 mL離心管,逐管編號(hào)。

(2)每管加入BufferA500mL。

(3)每管分別加入已處理的待檢樣品、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照各200mL,充分混勻,室溫放置10分鐘。

(4)取與上述離心管等量的DNase-Free吸附柱和收集管,編號(hào)。將離心管中的溶液轉(zhuǎn)移至DNase-Free吸附柱,(為避免堵塞吸附柱,盡量不要吸懸浮雜質(zhì))。

(5)用高速離心機(jī)設(shè)置13000 r/min室溫離心30秒。

(6)棄去收集管液體,將吸附柱放回收集管中。

(7)吸附柱內(nèi)加入600 μL Buffer B,13000 r/min離心30秒。

(8)棄去收集管液體,將吸附柱放回收集管中。

(9)重復(fù)步驟(7),(8)。

(10)13000 r/min空柱離心2分鐘,去除殘留液。

(11)將每個(gè)吸附柱分別移入新的1.5mL離心管中,向柱中央加入50μL Buffer C,室溫靜置1分鐘,13000 r/min離心30秒,離心管中液體即為模板DNA。獲得的DNA溶液,冰上保存?zhèn)溆茫ㄗ⒁馓崛〉腄NA須在2h內(nèi)進(jìn)行PCR擴(kuò)增,若需長(zhǎng)期保存須放置-80℃冰箱,但應(yīng)避免反復(fù)凍融)。

2、熒光PCR擴(kuò)增(使用B盒)

(1)從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液、Taq酶,室溫融化后,2 000 r/min離心5秒。設(shè)所需PCR管數(shù)為n(n = 樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系需要20 μL 熒光PCR反應(yīng)液和0.5 μL Taq酶。計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積小管中,充分混合均勻后,向每個(gè)PCR管中各分裝20μL。

(2)分別向上述PCR管中加入(11)中制備的DNA溶液各5μL,蓋緊管蓋,500 r/min 離心30秒。

(3)將加樣后的PCR管放入熒光PCR檢測(cè)儀內(nèi),作好標(biāo)記。反應(yīng)參數(shù)設(shè)置:

第一階段,預(yù)變性95℃/3分鐘

第二階段,95℃/15秒,52℃/10秒,60℃/35秒共45個(gè)循環(huán)。熒光收集在第二階段每次循環(huán)的60℃延伸時(shí)進(jìn)行。


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